同源真核细胞来说说同源重组的转移法是怎么来进行转移的呢

2020-07-29 17:07:24 49

   同源重组是将外源基因定位导入受体细胞染色体上的方法,因为在该座位有与导入基因同源的序列,通过单一或双交换,新基因片段可替换有缺陷的基因片段,达到修正缺陷基因的目的。

     根据氨基酸序列相似性和催化机制的差异,位点特异性重组酶主要分为两大家族,即整合酶系和解离酶/转化酶系,这两个家族相隔很远。整合酶家族催化重组的机制是进行酪氨酸介导的链交换,该家族包含有FLP/FRT等已经研究得比较清楚并广泛应用的重组酶系统。

    解离酶/转化酶家族催化机制是由丝氨酸介导的,当酶和DNA之间形成含磷的丝氨酸连接时,连接处DNA的4条链发生协调的交错断裂,然后重新结合,完成同源重组。该家族成员包括来自于链霉菌噬菌体的φC31整合酶、噬菌体的TP901—1整合酶、放线菌噬菌体的R4整合酶等。中C31整合酶(φC31—int)能够有效介导噬菌体基因组中位点与细菌宿主染色体上位点间的重组反应,将外源基因整合到基因组中,使转基因的持续、高效表达,为非病毒载体转移系统在遗传病基因治疗的应用开辟了新的途径。

     同源真核细胞来说说同源重组的转移法是怎么来进行转移的呢

     位点特异性重组是发生在两条DNA链特异位点上的重组,重组的发生需一段同源序列即特异性位点(又称附着点和位点特异性的蛋白因子)即重组酶参与催化。重组酶仅能催化特异性位点间的重组,因而重组具有特异性和高度保守性。

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